تست Cobas HPV یک روش fully automated real-time PCR DNA amplification است که در April 2011 تائیدیه FDA برای تشخیص HPV دریافت نمود.
میزان cut-off برای مثبت شدن تست HPV بر مبنای توانایی تشخیص یک ضایعه درجه بالا از ضایعات داخل اپی تلیالی (مساوی و یا بیشتر از CIN II) طراحی شده است.
بنابراین cut-off بر مبنای حداقل تعداد Viral copies در نمونه طراحی نشده است (در نتیجه مثبت کاذب تست کاهش می یابد).
وجود یک کانال چهارمی در این تست امکان چک زنجیره بتاگلوبین را در نمونه مورد آزمایش می دهد، که می تواند بیانگر:
- کفایت تعداد سلولهای اپی تلیال در نمونه مورد بررسی
- وجود موارد مهار کننده در نمونه که می تواند بعنوان مداخله کننده در تست تاثیر گذار باشد.
حداقل میزان تشخیص (Limit of Detection = LOD) برای HPV 16 و HPV 18 کمتر از 100 کپی در میلی لیتر است.
حداقل میزان تشخیص (Limit of Detection = LOD) برای سایر HPV ها بین 150 تا 2400 کپی در میلی لیتر است.
این تست به طور همزمان توانایی تعیین HPV 18, HPV 16 و Other hrHPV را بطور جداگانه داشته و در نتیجه بر مبنای گایدلاین ASCCP فالوآپ نمونه های سیتولوژیک نرمال و یا دارای ضایعات ASC-US را تسهیل می کند.
طبق مطالعه ATHENA تنها متدی است که با توجه به حساسیت بالا بعنوان پروتکل انتخابی HPV alone می تواند برای غربالگری کانسر دهانه رحم مورد استفاده قرار گیرد.
متدهای HPV DNA نسبت به متدهایی که mRNA انکوژن های E6/E7 (که بیانگر فعالیت انکوژنی ویروس می باشد) را اندازه گیری می کند، ارجحیت دارد.
بدلایل:
- کاهش ( Positive Predictive Values (PPV در گروه کم خطر و در نتیجه افزایش موارد مثبت کاذب تست،
- عدم کنترل کفایت نمونه توسط internal control تست و در نتیجه امکان کسب نتیجه منفی کاذب،
- مداخله لوبریکانت های حاوی Polyquaterinium 15 در کارآیی تست،
- مداخله ترکیبات ضد قارچی حاوی tioconazole کارآیی تست،
- موارد مثبت کاذب ناشی از تداخل وجود بعضی از Low risk HPV نظیر HPV genotypes 26, 67, 70, and 82 ،
- وجود خطای carry-over (یعنی اثر یک نمونه یا انتقال یک نمونه به روی نمونه بعدی) در حد 0.7%
