تهران، میدان ولیعصر کوچه مینو
02188912838
info@iragen.ir

مقالات

جداسازی DNA های حلقوی از باکتری ها ( استخراج پلاسمید )

جداسازی DNA های حلقوی از باکتری ها ( استخراج پلاسمید )

هدف: جداسازی DNA های حلقوی از باکتری ها ( استخراج پلاسمید )

دامنه کاربرد: کلونینگ، بررسی قطعات ژنی

این تکنیک همانند استخراج DNA می باشد با این تفاوت که در استخراج پلاسمید لازم است که DNA ی پلاسمیدی از مقدار زیادی DNA ی کروموزومی که در سلولهای باکتریائی موجود است مجزا شود. جداسازی دو DNA از یکدیگر مشکل است که روشهای متعددی برای حذف DNA ی باکتریائی طی خالص کردن پلاسمید وجود دارد.

در این تکنیک مرحله ای که باعث شروع فرآیند میشود این است که باید باکتری ها را لیز کنیم و با تغییر PH سبب دناتوره شدن DNA ژنومیِ ( کروموزوم اصلیِ) باکتری شویم ولی پلاسمیدها دناتوره نمی شوند.
در مرحله ی بعد با خنثی کردن PH سبب Clot شدن و رسوب DNA کروموزوم اصلی می شویم ولی پلاسمیدها همچنان محلول هستند.

در مرحله ی آخر میتوان با استفاده از فیلتر سبب رسوب پلاسمیدها روی فیلتر شویم و با کمک آب دیونیزه پلاسمیدها را از روی فیلتر جداسازی کنیم.
آزمایشات تخصصی همه روزه در آرمایشگاه ایراژن انجام میگردد.

000
خواندن 662 دفعه